研究报告

湿地藓LEAFY基因的克隆及原核表达分析  

王琦 , 李倩 , 阚诗卓 , 伍冉 , 李映 , 鄢波 *
西南林业大学园林学院, 昆明, 650224
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 16 篇   
收稿日期: 2018年09月04日    接受日期: 2018年09月12日    发表日期: 2019年12月14日
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摘要

本研究通过克隆湿地藓(Hyophila javanica) LEAFY 基因 cDNA 和开放阅读框(ORF)全长序列,诱导目的基因表达,旨在明确湿地LFY 基因的结构特征。采用 RT-PCR RACE 的技术克隆得到湿地藓FLORICAULA/LEAFY 的同源基因。该基因 cDNA 全长为 1 402 bp 1 219 bp (HjLFY1 HjLFY2)。其开放阅读框(ORF)1 050 bp,编码 349 个氨基酸,预测其相对分子质量为 40.39 kD。与其它物种的 LFY 基因氨基酸序列进行同源性比对并构建系统进化树,结果显示,湿地藓 LFY 基因与小立碗藓 LFY 基因的亲缘关系最近,同源性达 95%。将 LFY 基因插入 pThioHis A 载体中,构建 pThioHis A/LFY 原核表达载体,获得了融合蛋白 Trx-LFY,分子量约为 53 kD。研究结果为深入探讨其基因结构与功能的关系提供帮助。

关键词
湿地藓(Hyophila javanica);LFY 基因;原核表达

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